外源Wnt3a对体外培养奶牛乳腺上皮细胞数量及Frizzled 1受体和β-catenin表达的影响

doi:10.11843/j.issn.0366-6964.2014.08.011

畜牧兽医学报 ›› 2014, Vol. 45 ›› Issue (8): 1282-1287.doi: 10.11843/j.issn.0366-6964.2014.08.011

外源Wnt3a对体外培养奶牛乳腺上皮细胞数量及Frizzled 1受体和β-catenin表达的影响

崔亚利¹，孙海云¹，李建国^2*，高艳霞²，赵艳姣¹，李三吓¹

（1.河北农业大学动物医学院，保定 071001； 2.河北农业大学动物科技学院，保定 071001 ）

收稿日期:2014-01-25 出版日期:2014-08-23 发布日期:2014-08-23
通讯作者: 李建国，教授，E-mail:jgliauh@sohu.com
作者简介:崔亚利(1970-)，女，河北保定人，副教授，博士，主要从事动物组织胚胎学研究，E-mail：cuiyalidk@hebau.edu.cn，Tel：0312-7528472
基金资助:
现代农业产业技术体系建设专项资金项目（CARS-37）

Effect of Exogenous Wnt3a on Mammary Cell Number in Cow and the Expression of Frizzled 1 Receptor and β-catenin

CUI Ya-li¹，SUN Hai-yun¹，LI Jian-guo^2*，GAO Yan-xia²，ZHAO Yan-jiao¹，LI San-xia¹

(1.College of Veterinary Medicine，Agricultural University of Hebei，Baoding 071001，China;2.College of Animal Science and Technology，Agricultural University of Hebei，Baoding 071001，China)

Received:2014-01-25 Online:2014-08-23 Published:2014-08-23

摘要/Abstract

摘要：

旨在研究外源性重组Wnt3a蛋白对奶牛乳腺组织中上皮细胞数量及其Wnt信号通路中Frizzled 1受体和β-catenin mRNA表达的影响。采用组织块法培养奶牛乳腺上皮细胞，Western-blot方法对培养液中的β-酪蛋白进行鉴定。待组织块贴壁后，向培养液中分别加入0、10、25和50 ng•mL^-1的Wnt3a蛋白，并收集培养至10 d的细胞培养液和细胞。荧光定量PCR检测细胞中Frizzled 1受体和β-catenin mRNA的表达量。结果表明：50 ng•mL^-1的Wnt3a蛋白对增加乳腺上皮细胞数量的作用较明显，Frizzled 1受体 mRNA表达量显著增加，β-catenin mRNA表达量与对照组间没有差异。结果提示，外源Wnt 3a能够影响体外培养奶牛乳腺上皮细胞Frizzled 1受体表达量，增加乳腺上皮细胞的数量，提示Wnt信号通路可能参与乳腺组织生长发育的调控。

Abstract:

This experiment was aimed at studying the effects of exogenous Wnt3a on bovine mammary epithelial cell (BMEC) number and the expression of Frizzled 1 receptor and β-catenin.BMEC was cultured by adherent tissue culture.β-casein of culture medium was detected by Western-blot.BMEC was cultured in medium with 0，10，25 and 50 ng•mL^-1 Wnt3a separately，and then the BMEC and culture medium at 10 days were collected.The expression of Frizzled 1 receptor and β-catenin mRNA was checked by real time RT-PCR.The results showed that cell numbers in 50 ng•mL^-1 Wnt3a group were significantly higher than those of control group.The expression of Frizzled 1 receptor significantly increased，and there was not much difference in β-catenin expression between control group and Wnt3a group.It was concluded that Wnt3a exerts effects on the expression of Frizzled 1 receptor，moreover，promotes the number of BMEC.Current evidence suggested that Wnt signal played roles in the regulation of mammary development.

中图分类号:

S852.16

崔亚利，孙海云，李建国，高艳霞，赵艳姣，李三吓. 外源Wnt3a对体外培养奶牛乳腺上皮细胞数量及Frizzled 1受体和β-catenin表达的影响[J]. 畜牧兽医学报, 2014, 45(8): 1282-1287.

CUI Ya-li，SUN Hai-yun，LI Jian-guo，GAO Yan-xia，ZHAO Yan-jiao，LI San-xia. Effect of Exogenous Wnt3a on Mammary Cell Number in Cow and the Expression of Frizzled 1 Receptor and β-catenin[J]. ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA, 2014, 45(8): 1282-1287.

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外源Wnt3a对体外培养奶牛乳腺上皮细胞数量及Frizzled 1受体和β-catenin表达的影响

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